Expansion Microscopy-based imaging for visualization of mitochondria in Drosophila ovarian germline stem cells
- 作者:Chi-Hung Lin, Tzu-Yang Lin, Shao-Chun Hsu, Hwei-Jan Hsu
- 期刊: FEBS Open Bio12(2022) 2102-2110 https://febs.onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/2211-5463.13506
近期研究顯示,粒線體型態具有調節幹細胞活動及組織恆定的能力。 我們之前的研究結果顯示,老化的卵巢生殖幹細胞 (GSC)中具有較多短小的粒線體,且間接地導致幹細胞的流失。 由於一般的免疫螢光染色法所處理的樣本在螢光顯微鏡下所產生的影像解析度不足,以致於無法精準測量粒線體的長度及大小,又因為樣本經由化學固定法處理,且需裁切及利用電子顯微鏡拍攝更會耗掉許多精力與時間,但所得到的粒線體樣本數卻相當有限。為了克服這些困難,我們結合免疫螢光染色法及擴大顯微技術(Expansion microscopy)放大果蠅卵巢大約四倍。這種簡單、廉價的方法去更清楚呈現生殖細胞的粒線體型態。在這裡,我們將每個步驟詳細的列出來, 相信這個方法對想研究粒線體或是其他細小的次細胞結構的研究是有參考價值的。